Lokalne odnowienie dystrofiny za pomocą antysensownego oligonukleotydu PRO051 ad 5

Oprogramowanie ImageJ (W. Rasband, National Institutes of Health, http://rsb.info.nih.gov/ij) zostało wykorzystane do ilościowej analizy obrazu, jak opisano wcześniej.28,29 Całe przekroje zostały podzielone na serie od 6 do 10 sąsiednie obrazy, w zależności od wielkości sekcji. Aby zapewnić wiarygodne pomiary, w ciągu jednej sesji wykonano barwienie skrawków i rejestrację wszystkich obrazów przy użyciu stałych ustawień ekspozycji i uniknięcia nasycenia pikseli. Próg o mniejszej intensywności ustalono w tle dla dystrofii mięśniowej Duchenne a i zmierzono dodatnią fluorescencję dla każdej sekcji (procent powierzchni), zarówno dla dystrofiny jak i lamininy .2. Analizę Western blot przeprowadzono jak opisano uprzednio19 przy użyciu połączonych homogenatów z zestawów czterech seryjnych przekrojów 50 .m w całej próbce biopsyjnej. Continue reading „Lokalne odnowienie dystrofiny za pomocą antysensownego oligonukleotydu PRO051 ad 5”

STAT3 Mutacje w zespole hiper-IgE czesc 4

PolyPhen zgłasza punktację, z domniemanymi łagodnymi zmianami ocenianymi od 0,00 do 1,50, prawdopodobnie szkodliwymi zmianami uzyskanymi z 1,51 do 2,00, i prawdopodobnie szkodliwymi zmianami ocenionymi jako 2,01 lub więcej. Wyniki
Profilowanie genów leukocytów w genach
Stwierdziliśmy wyższy poziom ekspresji prozapalnych cząsteczek w niestymulowanych i stymulowanych fagocytozą leukocytach pacjentów z zespołem hiper-IgE niż u osób kontrolnych (rysunek w dodatkowym dodatku i tabele 1, 2, 3 i 4 w dodatkowym dodatku ). Trzydzieści transkryptów kodujących białka związane z transdukcją sygnału interferonu lub typowo indukowanych przez interferon wykazało podwyższony poziom ekspresji w leukocytach polimorfojądrowych od pacjentów z zespołem hiper-IgE (Tabela w dodatkowym dodatku). Znane lub przypuszczalne geny zaangażowane w obronę gospodarza były regulowane w górę w leukocytach polimorfojądrowych i jednojądrzastych komórkach krwi obwodowej pacjentów (Figura 1C w dodatkowym dodatku i Tabele 1, 2 i 3 w dodatkowym dodatku). Po fagocytozie 15 genów kodujących białka związane z transdukcją sygnału interferonu lub indukowanych przez interferon wykazywało podwyższone poziomy ekspresji w leukocytach polimorfojądrowych od pacjentów, w porównaniu z kontrolami kontrolnymi (Figura 2 w dodatkowym dodatku i Tabela 4 w dodatkowym dodatku). Continue reading „STAT3 Mutacje w zespole hiper-IgE czesc 4”

STAT3 Mutacje w zespole hiper-IgE cd

Kompletne dane mikromacierzy są dostarczane wraz z analizami w tabelach 1, 2, 3, 4 i 5 Dodatku Uzupełniającego. Surowe dane są dostępne na stronie internetowej Gene Expression Omnibus (www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/) pod numerem dostępu GSE8507. Wizualizowaliśmy implikowane ścieżki biochemiczne przy użyciu oprogramowania Ingenuity Pathways Analysis (Ingenuity Systems). Cytokiny
Jednojądrzaste komórki krwi obwodowej wytworzono przy użyciu wirowania w gęstości z heparynizowanej krwi pełnej, jak opisano wcześniej. Komórki stymulowano przez 48 godzin w 37 ° C w 5% dwutlenku węgla za pomocą fitohemaglutyniny (1: 100), fitohemaglutyniny z interleukiną. Continue reading „STAT3 Mutacje w zespole hiper-IgE cd”

STAT3 Mutacje w zespole hiper-IgE ad

Ci pacjenci i krewni zostali zapisani na studia zatwierdzone przez instytucyjną komisję przeglądową Narodowego Instytutu Alergii i Chorób Zakaźnych. Pobraliśmy próbki krwi, podczas gdy pacjenci byli klinicznie zdrowi i nie otrzymywali kortykosteroidów lub niesteroidowych leków przeciwzapalnych. Zastosowano empiryczny system oceny w celu obliczenia ryzyka przeniesienia cechy hiper-IgE na podstawie agregacji cech diagnostycznych.9 My arbitralnie skategoryzowaliśmy wyniki hiper-IgE od 0 do 15 jako niezmienione, 16 do 39 jako potencjalnie zmienione , 40 do 59 jako prawdopodobnie dotknięte, a 60 lub więcej zdecydowanie zaatakowane.9 Przeanalizowaliśmy próbki krwi z mikromacierzy otrzymane od probantów, którzy byli zdecydowanie dotknięci (mieli wyniki 60 lub więcej) i mieli ponad 16 lat. Przeprowadziliśmy również fenotypowanie cytokin na tych próbkach, oprócz tych z osób z rodzinnym i sporadycznym zespołem hiper-IgE (które obejmowały prawdopodobnie i prawdopodobnie dotknięte nią osoby). Do analizy sekwencji dostępne były próbki od 50 pacjentów i 48 członków rodziny. Continue reading „STAT3 Mutacje w zespole hiper-IgE ad”

Chemioterapia pooperacyjna i opóźnione promieniowanie u dzieci poniżej trzeciego roku życia z nowotworami złośliwymi mózgu ad 7

Obiektywne odpowiedzi obserwowano w miejscach zarówno pierwotnej choroby, jak i przerzutów w obrębie nerwicy. Chemioterapia zapobiegała progresji choroby, a dozwolona radioterapia była opóźniona o 1-2 lata u znacznej części pacjentów. Najlepsze wyniki uzyskano u pacjentów, u których stwierdzono całkowitą chirurgiczną resekcję zlokalizowanej choroby. W tej podgrupie 74 procent dzieci w wieku poniżej 24 miesięcy w chwili rozpoznania i 91 procent osób w wieku od 24 do 36 miesięcy nie miało progresji choroby podczas samego leczenia chemioterapią przez rok. Wśród młodszych pacjentów, którzy otrzymywali chemioterapię przez dwa lata, dwie trzecie osób z całkowicie wyciętymi lub zlokalizowanymi guzami nie miało progresji choroby po zakończeniu chemioterapii. Continue reading „Chemioterapia pooperacyjna i opóźnione promieniowanie u dzieci poniżej trzeciego roku życia z nowotworami złośliwymi mózgu ad 7”

Skuteczność aerozolizowanej tobramycyny u pacjentów z mukowiscydozą ad

Po wprowadzeniu zatyczki do nosa, inhalowano aerozol zawierający placebo (30 ml soli fizjologicznej o połowicznej mocy) lub tobramycynę trzy razy dziennie za pomocą nebulizera ultradźwiękowego (Ultraneb 100/99, DeVilbiss, Somerset, PA) 16,19. Wszyscy pacjenci ukończyli 200 inhalacji pływowych. Poprzednie dane in vitro20 wykazały, że stężenie tobramycyny w plwocinie musi być ponad 10-krotnie wyższe od minimalnego stężenia hamującego wrażliwej na tobramycynę P. aeruginosa (tj. . Continue reading „Skuteczność aerozolizowanej tobramycyny u pacjentów z mukowiscydozą ad”

Ekspresja endoteliny-1 w płucach pacjentów z nadciśnieniem płucnym ad 8

Jednak pojawienie się immunoreaktywności typu endoteliny-1 w komórkach nabłonka pęcherzyków płucnych pacjentów ze zwłóknieniem płuc było nieoczekiwanym i intrygującym odkryciem. Było to niezwykle rzadkie zdarzenie u pacjentów z nadciśnieniem płucnym bez zwłóknienia płuc i nie było obserwowane w grupie kontrolnej. Rola endoteliny-1 została zasugerowana w postępującym twardzinie układowej, 33,34 zaburzenie charakteryzujące się nieprawidłowym wytwarzaniem tkanki łącznej i zwłóknieniem35. Rzeczywiście, wykazano, że endotelina-1 może indukować proliferację fibroblastów i zwiększać wytwarzanie tkanki włóknistej in vitro33. Wykazanie, że komórki nabłonka pęcherzykowego eksprymują endotelinę-1 w obszarach bliskich ognisk włóknistego zastąpienia struktur pęcherzyków płucnych sugeruje rolę tego peptydu w patogenezie zwłóknienia płuc. Continue reading „Ekspresja endoteliny-1 w płucach pacjentów z nadciśnieniem płucnym ad 8”

Ekspresja endoteliny-1 w płucach pacjentów z nadciśnieniem płucnym ad 6

Siedmiu pacjentów miało jednak silniejsze wybarwianie endoteliny dla prekursora niż dla dojrzałego peptydu (trzy z grupy i cztery z grupy 2). Eksperymenty z kontrolą ujemną nie wykazały barwienia z odpowiednimi antyserumami (Figura 3G). Hybrydyzacja in situ ujawniła ekspresję mRNA endoteliny-1 u pacjentów z nadciśnieniem płucnym, głównie w śródbłonku naczyniowym, podczas gdy na autoradiografach od podmiotów kontrolnych były jedynie rozrzucone sygnały hybrydyzacji (Figura 3H). Klastry srebrnych ziaren znaleziono w naczyniowych komórkach śródbłonka tętnic płucnych z przyśrodkowym zgrubieniem i zwłóknieniem wnętrza w skrawkach płuc od pacjentów z nadciśnieniem płucnym (Figura 3A, Figura 3B i Figura 3C). Ogólny rozkład mRNA endoteliny-1 w porównaniu z immunobaraniem endoteliny-1 wykazano na skrawkach, które były zhybrydyzowane z sondą cRNA endoteliny-1 i wybarwione immunologicznie z antyserumami endoteliny-1 (Figura 3E i Figura 3F). Continue reading „Ekspresja endoteliny-1 w płucach pacjentów z nadciśnieniem płucnym ad 6”

Ekspresja endoteliny-1 w płucach pacjentów z nadciśnieniem płucnym ad 5

Immunoreaktywność na poziomie endoteliny-1 oceniano w śródbłonku tętnic płucnych i mięśni płucnych, naczyń włosowatych, żył płucnych i naczyń oskrzelowych. Poziom immunoreaktywności typu endoteliny-1 był istotnie większy u pacjentów z nadciśnieniem płucnym niż w grupie kontrolnej we wszystkich naczyniach. Gwiazdka wskazuje P = 0,003 dla porównania między grupami. Na Fig. 2 porównano immunoreaktywność endoteliny-1-podobnej w komórkach śródbłonka z każdego regionu naczyniowego w grupach pacjentów. Continue reading „Ekspresja endoteliny-1 w płucach pacjentów z nadciśnieniem płucnym ad 5”

Zapobieganie osteoporozie kortykosteroidów – porównanie wapnia, kalcytriolu i kalcytoniny ad 5

Jednoroczne wyniki reprezentowały 92 pacjentów, a dwuletnie wyniki 64 pacjentów. Pacjenci leczeni samym wapniem (grupa 3) stracili istotnie więcej kości z kręgosłupa lędźwiowego w pierwszym roku (-4,3 . 5,5% rocznie) niż grupy i 2 (-0,2 . 6,5 i -1,3 . 5,6% rocznie odpowiednio: P = 0,0035) (rysunek 1). Continue reading „Zapobieganie osteoporozie kortykosteroidów – porównanie wapnia, kalcytriolu i kalcytoniny ad 5”